公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FCGRT & B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒 Cherax quadriatus lipovitellin/vitellin,Lv/Vn  紅螯光殼螯蝦卵黃脂0蛋白/卵黃0蛋白 96T

Membralin： 高度保守基因相關(guān)蛋白Membralin抗體 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)

CV-1 [Part of the Wistar Special Collection]非洲綠猴腎細胞 CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] in African green monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠血小板生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T)  兔心肌特異性肌鈣蛋白T 96T

MNX1： 運動神經(jīng)元及胰腺同源蛋白1抗體 CD7 Others Human 人 CD7 人細胞裂解液 (陽性對照)

腸靜脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒 MAdCAM-1(Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1)  人黏膜地址素細胞黏附分子 96T

Phospho-HER3 (Tyr1197)： 0酸化HER3受體抗體 CL-0250801-D (人巨細胞性肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

HME4細胞，人黑色素瘤細胞 青春雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0905 人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA 試劑盒 CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化白細胞粘附分子抗原 0.5mg

Phospho-HER3 (Tyr1222)： 0酸化HER3受體抗體 HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚胎，皮膚，肌肉;M-20 人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒 CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細胞抗原CD177抗原 0.5mg

Phospho-HER4 (Tyr1284)： 0酸化HER4抗體 Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001A

ES-2人卵巢透明細胞癌細胞LAN-6 神經(jīng)母細胞瘤 大鼠骨成型蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒 HBsAb(Human anti-hepatitis B virus surface antibody)  人抗乙型肝炎病毒表面抗體 SW 1271[SW-1271;SW1271]細胞，人肺腺癌細胞 人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞,Caki-1細胞 人表皮黑色素細胞-HEM-a

MME Others Human 人 CD10 / MME / Neprilysin 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 IL-12/P40  大鼠白介素12 96T

PSRC1： 富含脯酸/絲酸卷曲螺旋蛋白1抗體 CM-M008小鼠支氣管成纖維細胞培養(yǎng)基100mL

ES-2人卵巢透明細胞癌 ES-2 human ovarian clear cell carcinoma McCOY's 5A+10%FBS 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA 試劑盒 VEGF-C  大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C 96T

p47-phox： NADPH氧化酶活化蛋白p47抗體 PDCD1 Others Human 人 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照)