公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CL-0272EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠(VE)ELISA試劑盒 HBeAg(Mouse hepatitis B virus e antigen)  小鼠乙型肝炎e抗原 96T

MRP8： 多藥耐藥相關蛋白8抗體 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2

PA-1(人卵巢腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 H9c2(2-1)(大鼠心肌細胞) 大鼠(VE)ELISA 試劑盒 F X III  大鼠ⅩⅢ 96T

MRP7： 多藥耐藥相關蛋白7抗體 小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469]

IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 大鼠維生受體(VDR)ELISA試劑盒 F III  大鼠Ⅲ 96T

NR8383(大鼠肺泡巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 Integrin AlphaE2/CD103 整合素αE2抗原 0.2ml

phospho-IRS1(Ser332 + Ser336)： 0酸化胰島素受體底物-1抗體 大鼠間充質(zhì)干細胞-骨髓RMSC

CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白 人腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒 ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原 0.5mg

phospho-IRS1(Ser612)： 0酸化胰島素受體底物-1抗體 XCL1 Others Canine 狗 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人外周血白細胞培養(yǎng)基 100mL 人腸病毒(Eerovirus)ELISA 試劑盒 IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mg

KB人口腔表皮癌細胞PCK1： 0酸烯醇酸羧激酶抗體 Cyc-tAg細胞，小鼠T淋巴細胞瘤(SV40T抗原轉(zhuǎn)染) 人卵巢癌耐藥株,A2780/Taxol細胞 人肺動脈成纖維細胞裂解物HPAFL

ILKAP Others Human 人 ILKAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 PGF2 Alpha(Human Prostaglandin F2 Alpha)  人前列腺素F2α 96T

PAPOA： 多聚合酶α抗體 狗肺成纖維樣細胞;DogL1

小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記) 大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4)ELISA試劑盒 tPSA(Human total prostate s pecific antigen)  人總前列腺特異抗原 96T

PAPOG： 多聚合酶g抗體 IGF1R Others Human 人 IGF1R 人細胞裂解液 (陽性對照)