公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

商品屬性

描 述 ：

該 酶 來 源 于 Bacillus stearothermophilus DNAPolymerase I，通過基因工程手段去除了其 5’-3’外切酶活性，而保留了 5’-3’聚合酶活性。該酶具有很強(qiáng)的鏈置換能力，因此是 Isothermal amplification (LAMP, RT-LAMP)的用酶。與野生型 Bst DNA 聚合酶（大片段）相比，該酶在擴(kuò)增速度、產(chǎn)量、耐鹽性和熱穩(wěn)定性等方面均有大幅提高，同時，該酶可以使用 dUTP 作為底物進(jìn)行擴(kuò)增(Bst 大片段無此活性)。

單位定義
一個活力單位即在 65°C 條件下，30 分鐘內(nèi)催化 10 nmoldNTP 的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。
應(yīng)用：
DNA 等溫擴(kuò)增
富含 GC 結(jié)構(gòu)的快速測序
微量模板 DNA 的快速測序
失活：
85°C，5min 失活。
儲存：-20℃可保存 3 年。
典型的 LAMP 反應(yīng)
1. 按以下組分配制 LAMP 反應(yīng)液
Bst 2.0 DNA Polymerase ( 8 U/μl) 0.25~1 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA 10 ng~1 μg
*10X Primers 2.5 μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers：16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4-8 μM LpF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
使用注意事項(xiàng)：
(1) Mg2+的使用濃度為 4~10 mM 濃度，Isothermo Buffer中沒有 Mg2+，通常情況下，在 6-8mM Mg2+條件下可獲得較好的 LAMP 結(jié)果。
(2) 有文獻(xiàn)報道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用無模板 DNA 作為對照檢測擴(kuò)增的特異性。

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