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化橘紅探針法PCR鑒定試劑盒說明書

更新時(shí)間:2025-12-01

簡(jiǎn)要描述:

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儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

化橘紅探針法PCR鑒定試劑盒說明書

英文名稱

citri grandis

貨號(hào)

BH-P99161

特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測(cè)。 
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購(gòu)上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無(wú)菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注:陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照為已經(jīng)抽提好的核酸(無(wú)需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽(yáng)性對(duì)照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽(yáng)性對(duì)照。 
KC-5103  Tifluadom/KC-5103  質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousebasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISAKit 96T/48T

/  Valacyclovir HCl  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人高半(Hcy)試劑盒 Human Homocysteine,HCY ELISA Kit

/(標(biāo)準(zhǔn)品)  Valacyclovir HCl  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rathemeoxygenase1,HO-1ELISAKit大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

維庫(kù)銨  Vecuronium Bromide  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR BJ5183鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X100微升

維庫(kù)銨(標(biāo)準(zhǔn)品)  Vecuronium Bromide  質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

硫酸長(zhǎng)春地辛  Vindesine sulfate  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠生長(zhǎng)分化因子15(GDF-15)ELISA試劑盒 ,英文名: GDF-15 ELISA Kit

扎西他濱,2',3'-二脫氧胞苷  Zalcitabine,DDC  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測(cè)試劑盒ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 96T/48T

玉米素核苷   Trans-Zeatin Riboside   質(zhì)量規(guī)格:>98%,反式,BR 人5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgM)試劑盒 Human 5-hydroxyyptamine/serotonin(5HT/ST)aibody(IgM)ELISA kit

齊留通  Zileuton  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱MouseIL-10ELISAKIT小鼠白介素10(IL-10)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T

齊留通(標(biāo)準(zhǔn)品)  Zileuton  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織CDK2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
Colelomycerone A  中文名:  分子式:C17H18O6    豬血栓調(diào)節(jié)蛋白elisa試劑盒   豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T 

Clotrimazole  中文名:  分子式:C22H17ClN2    豬性血友病因子elisa試劑盒   豬性血友病因子試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T  

Clorofene  中文名:4-氯-2-芐基  分子式:C13H11ClO    豬細(xì)胞粘附分子-1elisa試劑盒   豬細(xì)胞粘附分子-1試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T 

Clopidogrel bisulfate  中文名:硫酸氫  分子式:C16H18ClNO6S2    豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒  

Clevidipine butyrate  中文名:丁酸氯維地平  分子式:C21H23Cl2NO6    豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
  Nateglinide  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)  大鼠糖原0酸化酶(GP)試劑盒 Rat glycogen phosphorylase,GP ELISA Kit

  Nateglinide  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T

丁東莨菪堿    "(-)scopolamine N-butyl bromide "  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit

單寧酸,鞣酸,丹寧酸  Tannic acid  質(zhì)量規(guī)格:AR,98% 大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T

馬拉韋若  Maraviroc  質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T

群勃龍醋酸酯   Revalor-H Trenbolone acetate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit

(標(biāo)準(zhǔn)品)  Silibinin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 96T/48T

  Silibinin  質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒 Rat glycogen syhase kinase,GSK ELISA Kit

依澤替米貝;依折麥布  Ezetimibe  質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠糖原合成酶激酶3α(GSK3A)試劑盒 Rat glycogen syhase kinase 3 alpha,GSK3A ELISA kit

依澤替米貝;依折麥布(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ezetimibe  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠糖原合成酶試劑盒 Rat glycogen syhetase ELISA Kit
化橘紅探針法PCR鑒定試劑盒說明書N-亞硝基哌啶,10 ng/ul于甲醇 標(biāo)準(zhǔn)品 Penconazole  10ng/ul于甲醇,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)

N-亞硝基嗎啉 10ng/ul 標(biāo)準(zhǔn)品 Nonadecanoicacidmethylester  10ng/ul于甲醇,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)

N-亞硝基-雙-異-丙基胺,10ng/ul于甲醇 標(biāo)準(zhǔn) N-Nitroso-di-iso-pro  10ng/ul于甲醇,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無(wú)核酶處理。

3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

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