K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*10操作方法（以下操作均按無(wú)菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）
1 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無(wú)菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。
●  一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA 體積不要超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
以下實(shí)驗(yàn)以100 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
 K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*102 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（100 μl 的感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和），輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3 分鐘，該過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。
4 向每個(gè)離心管中加入900 μl 無(wú)菌的SOC 或LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）， 混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1 小時(shí)（160-220 轉(zhuǎn)/分鐘），目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。
 K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*105 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100 μl 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的彎頭玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開(kāi)。將平板置于室溫直至液體被吸收，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 小時(shí)。
●  涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來(lái)調(diào)整。如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取更少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。如果預(yù)計(jì)的克隆較少，可通過(guò)離心（4,000 rpm, 2分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過(guò)少可以將剩下的菌液再涂布新的培養(yǎng)板）
 注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在 -70℃，不可多次凍融和放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無(wú)菌條件的要求進(jìn)行。
3 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。
以下是的相關(guān)產(chǎn)品：

 BV 猴B病毒 規(guī)格： 48T/96T

 Lv/Vn 紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MHC/RhLA 恒河猴主要組織相容性復(fù)合體 規(guī)格： 48T/96T

 SCT 規(guī)格： 48T/96T

 C4 鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白4 規(guī)格： 48T/96T

 C3 鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3 規(guī)格： 48T/96T

 Vtg 蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原 規(guī)格： 48T/96T

 TF 大鼠組織因子 規(guī)格： 48T/96T

 t-PA 大鼠組織型纖溶酶原激活劑 規(guī)格： 48T/96T

 TPA 大鼠組織多肽抗原 規(guī)格： 48T/96T

 HD 大鼠組織蛋白去乙?；?規(guī)格： 48T/96T

 cath-K 大鼠組織蛋白酶K 規(guī)格： 48T/96T

 histon-H2b 大鼠組蛋白H2b 規(guī)格： 48T/96T

 HIS 大鼠組胺 規(guī)格： 48T/96T

 TBA 大鼠總膽汁酸 規(guī)格： 48T/96T

 TFR/CD71 大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 規(guī)格： 48T/96T

 TGFβ2 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 規(guī)格： 48T/96T

 TGF-β1 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 規(guī)格： 48T/96T

 TGF-α 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α 規(guī)格： 48T/96T

 MHCⅢ/H-1Ⅲ 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類 規(guī)格： 48T/96T

 MHCⅡ/H-1Ⅱ 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類 規(guī)格： 48T/96T

 MHCⅠ/H-1Ⅰ 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類 規(guī)格： 48T/96T

 MBP 大鼠主要堿性蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TSGF 大鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子 規(guī)格： 48T/96T

 TRAIL-R4 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4 規(guī)格： 48T/96T

 TRAIL-R3 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3 規(guī)格： 48T/96T

  K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*10TRAIL-R1 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1 規(guī)格： 48T/96T

 TNFsR-Ⅱ 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T

 TNFsR-Ⅰ 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T

 TNF-β 大鼠腫瘤壞死因子β 規(guī)格： 48T/96T