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DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100

更新時(shí)間:2026-03-23

簡(jiǎn)要描述:

DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100菌株一種常用于質(zhì)??寺〉木辍F洇?0lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。

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操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
2. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時(shí),由于營(yíng)養(yǎng)不足,陽性克隆生長(zhǎng)變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。

載脂蛋白C3抗體 CTSH ELISA Kit 組織蛋白酶H(CTSH)ELISA試劑盒
載脂蛋白E4抗體 Cath G Ab ELISA Kit 組織蛋白酶G自身抗體(Cath G Ab)ELISA試劑盒
自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體 cath-G ELISA Kit 組織蛋白酶G(cath-G)ELISA試劑盒
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 cath-D ELISA Kit 組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 CTSC ELISA Kit 組織蛋白酶C(CTSC)ELISA試劑盒
磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 HAT ELISA Kit 組蛋白乙?;?HAT)ELISA試劑盒
磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 HDAC2 ELISA Kit 組蛋白脫乙?;?(HDAC2)ELISA試劑盒
脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 HDAC3 ELISA Kit 組蛋白去乙?;?(HDAC3)ELISA試劑盒
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 HDAC ELISA Kit 組蛋白去乙?;?HDAC)ELISA試劑盒
磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 SETD7 ELISA Kit 組蛋白賴氨酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7(SETD7)ELISA試劑盒
磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B ELISA Kit 組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 histon-H2b ELISA Kit 組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒
磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 HIS ELISA Kit 組胺(HIS)ELISA試劑盒
磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 PCX ELISA Kit 足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒
乙酰羧化酶抗體 tPSA ELISA Kit 總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒
磷酸化乙酰羧化酶抗體 TPS ELISA Kit 總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒
磷酸化Ack1抗體 TPC ELISA Kit 總蛋白C(TPC)ELISA試劑盒
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 TBA ELISA Kit 總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體 NK ELISA Kit 自然殺傷細(xì)胞(NK)ELISA試劑盒
磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 NRAMP-2 ELISA Kit 自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白2(NRAMP-2)ELISA試劑盒
磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 NRAMP-1 ELISA Kit 自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白1(NRAMP-1)ELISA試劑盒
磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 Pax ELISA Kit 樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒
磷酸化ATR抗體 TF ELISA Kit 轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒
細(xì)胞核重定位及紡錘體檢查點(diǎn)蛋白AMN1抗體 TFR/CD71 ELISA Kit 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
天連接糖基化11抗體 TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B ELISA Kit 轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)ELISA試劑盒

ACTR2 激活素受體2A抗體
Activin Receptor Type IIB 激活素受體2B抗體
C2orf88  2號(hào)染色體開放閱讀框88抗體
ARHGEF18 G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體
Activin A Receptor Type IB 激活素受體1B抗體
ARA24 雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體
Amyloid Precursor Protein 淀粉樣肽前體蛋白抗體
ADCY2 腺苷酸環(huán)化酶2抗體
APOC3 載脂蛋白C3抗體
Apolipoprotein E4 載脂蛋白E4抗體
AMBRA1 自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體
Phospho-ATG4C 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體
Phospho-ATG4C 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體
phospho-ASK1  磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體
phospho-ATXN1  磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100phospho-Amyloid Precursor Protein  磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
phospho-ASK1  磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體
phospho-ASK1  磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體
phospho-ATF2  磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
Phospho-ATP1A1  磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體
Phospho-ATP1A1  磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體

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