訂購(gòu)信息：
 產(chǎn)品名稱：鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格：50T
編號(hào)：BH-P96786
分類：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                   1份
使用及效果：
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

NP Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 去甲基鹽酸左Desmethyl Levofloxacin 美國(guó)進(jìn)口

小鼠前胃癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFP左Levofloxacin美國(guó)進(jìn)口

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 色素瘤細(xì)胞，B16細(xì)胞 Pr-HNV8細(xì)胞，菜青蟲(chóng)卵巢細(xì)胞左-d8Levofloxacin-d8美國(guó)進(jìn)口

293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA5-羥基5-Hydroxy Lornoxicam美國(guó)進(jìn)口

KNG1 Others Mouse 小鼠 KNG1 / BDK / kininogen-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) -d4Lornoxicam-d4美國(guó)進(jìn)口
NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2  APCDD1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4'-羥基美國(guó)進(jìn)口4'-Hydroxy Nimesulide

小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞MOPC咪康唑美國(guó)進(jìn)口Miconazole

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 美國(guó)進(jìn)口Midecamycin

胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF葡萄糖苷酸美國(guó)進(jìn)口Minoxidil Glucuronide

大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;A7r5 肝癌細(xì)胞，SMMC-7721細(xì)胞 ECA細(xì)胞，小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞加蘭他敏（）HPLC≥98%，無(wú)
鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測(cè)試劑盒PGK1 Others Mouse 小鼠 PGK1 / PGKA 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三嶙酸脫氧胞苷鈉鹽，英文名或英文縮寫：dCTP，2Na，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1 O.D.

腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R皂土;膨潤(rùn)土;漿土;膠狀黏土 Bqntonitq;Wilkinitq;Dqnvqr clcy;qr clcy 130-78-9

HO-8910PM細(xì)胞，高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞 胃粘膜細(xì)胞,GES-1細(xì)胞 狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1D-半乳糖鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：D-Galactosamine HC1，級(jí)別：高，98%，規(guī)格：5KU

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3N-亞硝基本基羥鹽，英文名或英文縮寫：Cupferron，級(jí)別：CP，規(guī)格：25克

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N,N-Dimetxylfonmemi7e 500ml原裝 Amresco 0464