公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞) 大鼠嗜鉻蛋白A(CHGA)ELISA試劑盒 CD14(Rat Troponin T)  小鼠CD14分子 96T

Natriuretic Peptide Receptor B： 利肽受體B抗體體細(xì)胞;HEL

白細(xì)胞介素-12超家族 大鼠視網(wǎng)膜血管瘤抑制因子(vHL)ELISA試劑盒 PP  大鼠胃 96T

NPRC： 利肽受體C抗體 GADD45A Others Human 人 GADD45A / DDIT-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 ECF(Human eosinophil chemotactic factor)  人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子 96T

phospho-ITGB4(Tyr1526)： 0酸化整合素β4抗體 胃癌組織源性原代成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標(biāo)簽) 人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型) 0.5mg

IQCD： IQCD蛋白抗體 PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA 試劑盒 Shiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素菌體蛋白(O139菌型) 0.5mg

IQCC： IQCC蛋白抗體 獼猴肺細(xì)胞;MML2 人肝癌細(xì)胞，SNU-398細(xì)胞 CNE(鼻咽癌細(xì)胞)

MV-4-11人髓性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞RASSF6： RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3

CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒 IRAK(Human interleukin receptor associated kinase)  人白介素受體相關(guān)激酶 96T

RALA： Ras樣蛋白A抗體 ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人表皮黑色素細(xì)胞-中色素cDNAHEM-m cDNA 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 試劑盒 UK(Human urokinase)  人 96T

Regucalcin/SMP30： 衰老標(biāo)記蛋白30抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO